专家深思熟虑：液体活检在临床诊疗应用和医学检验实践中的专家深思熟虑

混合物组织学(liquid biopsy)在流行病学病因处方应用的应该用日渐广泛，是意味着对"异化精确医疗"的这两项方法。为科学约束混合物组织学系统设计在流行病学验证里的应该用，里华药理学会验证药理学分会、第三世界卫生健康该委员会流行病学验证里心共同制定了《混合物组织学在流行病学护理应该用和药理学验表明践里的研究员深思熟虑》。本研究员深思熟虑围绕CTC和ctDNA两种遗传物质，综合近年来刊发的混合物组织学应用这两项数据研究成果、交合我国混合物组织学的流行病学实践市场需求，就关的的流行病学特指测定系统设计的全面实施和质量管理者提可供基本上个人兴趣原则。混合物组织学系统设计的可选择(一)ctDNA测定系统设计的可选择目年前为止，研究所特指的ctDNA测定系统设计最主要缩减到受阻特异性体系(amplification refractorymutation system，ARMS)、二代核酸(next－generation sequencing，NGS)、位数PCR(digital PCR，dPCR)和酶质质可知测定等。ARMS方规是目年前为止获里国肉类药品监督管理者局(China Food and DrugAdministration，CFDA)批准后可用作流行病学ctDNA测定的方规，在流行病学实践里应该用相对普及。由于NGS方规在系统设计与费用上都普遍存在困难重重，使得ARMS在测定诸如EGFR等已确定特异性里兼具明显劣势。针对确实特异性的考古学家，NGS方规则兼具其他方规无可比拟的系统设计劣势。最主要Nature Medicine、Lancet Oncology及New England Journal of Medicine在内诸多顶级期刊所报导的多项流行病学试验交果表明NGS在致病风险评估里兼具这两项的流行病学这两项性：通过NGS风险评估可直接考古学家致病另行特异性，设法优化打压措施，贯彻减少酶质处方。dPCR和基于质可知的酶质测定方规尽管可应该用作已确定特异性ctDNA的测定，但局限研究所自建，尚考虑到高等级循证药理学确实的反对，目年前为止仍不易离开流行病学实践。基于上述数据研究交果与流行病学确实，国家科委忽视测定已确定、单个酶质处方引人注目或致病改型特异性时，敦促可用ARMS方规；测定已确定、多个平行流行病学处方机理或断定确实遗传物质、冒险流行病学这两项性与关的选择性时敦促可用NGS方规；dPCR兼具的测试NGS测定交果的潜能，但在应该用年前应该当严格研究报告其测定连续性能指标与流行病学意义。(二)CTC测定系统设计CellSearch平台是目年前为止唯一被CFDA批准后用作定连续性测定可逆血里表皮来源线粒体的系统设计。其在判断转移连续性交高血压、乳腺癌及癌患儿生存率的流行病学应该用这两项性兼具高等级循证药理学确实反对。但此测定系统设计普遍存在漏检率较高、富集后CTC活连续性差不易进行时近期遗传物质组研究等缺点。其他测定系统设计如免疫磁珠规和索科利夫卡过滤规等，尽管在多上都展露优良的CTC测定连续性能指标，但目年前为止仍考虑到足够的循证药理学确实反对其流行病学应该用。故流行病学基本上测定CTC，敦促各研究所可选择适合于自身状况的测定系统设计，在适当研究报告其测定连续性能指标后，应该用作日常工作流行病学实践里可选择混合物组织学系统设计：深思熟虑1 测定患儿ctDNA是否含有已确定的、单个酶质处方引人注目或致病改型特异性时，敦促可用ARMS方规。深思熟虑2 测定患儿ctDNA已确定的部分或全部流行病学口服处方机理可知或致病指示机理可知，或断定患儿遗传物质确实特异性、冒险流行病学这两项性与关的选择性时敦促可用NGS方规。深思熟虑3 流行病学基本上测定CTC，敦促各研究所可选择适合于自身状况的测定系统设计，在适当研究报告其测定连续性能指标后，应该用作日常工作。混合物组织学的应该用适用范围(一)现代除此以外病因1．ctDNA现代除此以外病因这两项性：随着测定系统设计引人注目度减少，目年前为止ctDNA已可在现代心脏病、交高血压、乳腺癌、白血病以及心脏病患儿可逆里被已确定，提醒ctDNA对于这几种恶连续性兼具现代除此以外病因潜能。必须注意到的是，特定特异性例如P53特异性可在健康许多人里被已确定；此外，可用作现代病因除此以外ctDNA底物可知在有所不同癌种变异度较大且都未经过大样本流行病学的测试，确实精准度仍不完全一致。因此，能够冒险越来越特异的ctDNA底物可知并设计大规模年前瞻连续性流行病学试的测试实其这两项性，目年前为止间距真正流行病学应该用还有较大间距。2．CTC现代除此以外病因这两项性：既往CTC数据研究多集里于其转移/住院的预测这两项性。近年来数据研究表明CTC的释放是一种现代流血事件，提醒CTC对现代除此以外病因兼具这两项这两项性。然而非患儿例如炎症连续性性疾病或慢连续性肝炎患儿体里可已确定低水平的假阳连续性交果。由此可见，目年前为止CTC并非一种完美的现代除此以外病因遗传物质。此外，目年前为止也考虑到CTC展露优于MRI病因的流行病学确实。综上，近期CTC仍不适合于单独用作现代除此以外病因，能够更为多的循证药理学确实证明了其这两项性。(二)个人兴趣流行病学处方1．ctDNA的流行病学处方个人兴趣发挥作用：精确处方可通过测定相应该的遗传物质接收者，可选择合适的酶质口服用作近期处方。故ctDNA测定可提可供十分这两项的参照接收者。截止2018年3同月，主要关的遗传物质改变的酶质口服可选择如表1上图。能够注意到的是，目年前为止ctDNA测定仅在非小线粒体心脏病里被美国肉类药品监督管理者局(Food and DrugAdministration，FDA)批准后用作个人兴趣EGFR半胱氨酸趋化因子酶抑制剂可选择并写入美国国立综合肝癌网络(National Comprehensive Cancer Network，NCCN)简介。对于其他口服可选择，目年前为止仍正处于冒险下一阶段，尤其在测定T790M时，对阴连续性交果应该能够通过近期的组织测定进行时确认。因此，下一代还能够更为多年前瞻连续性循证药理学确实来支撑ctDNA的个人兴趣发挥作用。2．CTC的流行病学处方个人兴趣发挥作用：CTC作为完整线粒体，兼具多种来源的接收者，最主要酶、DNA特异性、解码及非解码RNA接收者等。针对CTC的体外培养与药敏实验被证明了可用作筛选酶质口服，兼具巨大的流行病学转变成潜能。但是，现有流行病学CTC测定体系在活连续性CTC分开关键问题上仍普遍存在关键连续性的系统设计困难重重，尚不能保证提可供多元化接收者以个人兴趣酶质处方的流行病学市场需求；其他CTC分开测定系统设计或个人兴趣这两项性不完全一致或短时两者之间内不易转变成。故尽管CTC测定对于个人兴趣流行病学实行精确处方兼具这两项的潜在这两项性，但在更为先进的系统设计和更为可靠的流行病学确实出现之年前，不鼓励在确实流行病学工作里用其个人兴趣酶质化疗。(三)酶质口服随之而来病因1．ctDNA在酶质口服随之而来病因里的应该用：酶质口服可用过程里实行随之而来病因直接地确保口服安全连续性与直接连续性，是执行"精确医疗"理念的核心步骤之一。因此，随之而来病因在流行病学职能部门里的这两项性愈发很大。截至2018年4同月，就有多种酶质口服随之而来病因的系统被FDA批准后用作确实流行病学工作，常见限于随之而来病因的口服及其机理如表2上图。ctDNA测定相对于基本上组织组织学兼具非侵入连续性、患儿依从连续性好、异质连续性低、可反复取材等劣势，其在酶质口服随之而来病因里兼具太大的劣势。目年前为止，ctDNA测定应该用作非小线粒体心脏病EGFR酶质处方随之而来病因已被NCCN写入简介。下一代随之而来着更为先进系统设计以及更为多流行病学确实的出现，将会有越来越多ctDNA测定用作酶质口服随之而来病因。2．CTC在酶质口服随之而来病因里的应该用：目年前为止并无循证药理学确实提醒CTC可应该用作随之而来病因，但特别是在数据研究说明了CTC底物可知研究对于酶质口服随之而来病因兼具全力意义。下一代能够更为多的在在流行病学确实适当冒险CTC在随之而来病因里的发挥作用。(四)数据处理风险评估1．ctDNA数据处理风险评估这两项性：相比传统的MRI与血清酶类数据研究课题，ctDNA在说明了上都兼具更为好的特异连续性与引人注目度，观点上可准确说明了本机超载的细微推移。就有特别是在队列数据研究表明连续风险评估患儿体内ctDNA特异性重元素的推移可说明了处方后变异超载推移，设法提醒流行病学更为换直接的处方策略。但是，目年前为止ctDNA测定普遍存在重复连续性不佳、有所不同研究所两者之间测定交果某种程度较差、测定交果在有所不同研究所两者之间互换连续性低、考虑到量化DNA超载的最佳单位等瑕疵，严重制约了ctDNA在流行病学实践里的应该用这两项性。因此，测定ctDNA说明了数据处理仍正处于流行病学年前下一阶段，亟待系统设计进步与大规模RCT数据研究来适当的测试其这两项性。2．CTC数据处理风险评估这两项性：CTC在说明了里的劣势在于其接收者的多维连续性，除数量推移外还可提可供丰富的变量可供流行病学研究，从而的系统地描绘出演变底物图可知。数据研究说明了CTC动态推移与很大关的，且较MRI与酶类数据研究课题展露更为好的引人注目度与特异连续性。但是，在现有测定系统设计状况下其研究报告精准度略逊于ctDNA，且CTC测定普遍存在诸如重复连续性较差、可逆空两者之间异质连续性、考虑到即使如此分开解决方案等瑕疵，放宽其大规模流行病学应该用。因此，CTC继续不是一种可并不需要应该用作流行病学风险评估的即使如此遗传物质，其转变成不足之处更为好的测定系统设计出现与更为多的流行病学确实表明。(五)实质性与不好生存率现代警告1．ctDNA现代警告发挥作用：ctDNA测定对于最主要心脏病、交高血压、乳腺癌在内的多种本体瘤实质性兼具这两项警告这两项性，其重元素改变可早于MRI断定住院/转移又叫。这意味着可通过ctDNA测定筛选出住院/实质性持续性的患儿，为其在流行病学实质性年前孕育打压处方的机会。此外，ctDNA重元素也与患儿无病生存期(disease free survival，DFS)以及总体生存期(overall survival，OS)密切关的，特定亚生化ctDNA的已确定对预测患儿生存率兼具这两项预测这两项性。但是，目年前为止大部分报导为小样本数据研究，考虑到大样本、多里心、年前瞻连续性设计的流行病学试验；此外亦考虑到在在循证药理学确实反对患儿能够从ctDNA个人兴趣的流行病学决策里获比基本上管理者更为多的流行病学收益。因此，流行病学转变成ctDNA用作实质性与不好生存率现代警告仍能够更为多的在在循证药理学确实。2．CTC现代警告发挥作用：CTC测定被FDA批准可用作警告转移连续性交高血压、转移连续性乳腺癌、转移连续性癌患儿的疾病实质性/不好生存率。对其他本体恶连续性例如恶连续性黑色素瘤、心脏病、胃癌等，CTC也展露良好的预测这两项性。但是，目年前为止仍考虑到足够的循证药理学确实反对CTC测定在其他恶连续性里的现代警告这两项性。下一代能够更为多设计良好的流行病学试验来表明CTC在实质性/不好生存率现代警告里的这两项性。(六)致病选择性冒险1．ctDNA在致病选择性冒险里的应该用：ctDNA在说明了酶质处方获连续性致病里兼具天然劣势，通过高清晰度方规ctDNA变异情形，进而绘图获连续性致病遗传物质推移演变图可知直接地探究致病另行选择性，断定另行的处方机理；在断定特定亚生化与致病关联连续性的框架上，深入研究致病生化亚群并探究其底物选择性，可为翻盘获连续性致病提可供适当的转变成依据。因此，ctDNA是一种非常即使如此的致病选择性冒险早先。能够注意到的是，目年前为止此应用的数据研究正正处于起步下一阶段，还不足以导入流行病学实践。2．CTC在致病选择性冒险里的应该用：CTC本身作为转移/住院的"种子"，其展露的肿瘤样特征、表皮－两者之间充质转变成特征、以及过强的耐受战斗能力都提醒其是演变过程里耐受处方的生力军与基石。就有数据研究表明通过研究CTC遗传物质可知可探究化疗耐受的具体选择性，并藉此翻盘致病。但是目年前为止此应用数据研究仍局限于极小部分的患儿，对的异质连续性与复杂连续性考虑未必适当，广泛连续性仍不足之处的测试。混合物组织学应该用适用范围：深思熟虑4 推荐混合物组织学应该用作无规获取组织标本的患儿。深思熟虑5 ctDNA测定可应该用作个人兴趣心脏病EGFR酶质口服可选择与随之而来病因，ctDNA可能用作风险评估、现代除此以外病因及实质性与不好生存率现代警告，但近期局限研究机构冒险。深思熟虑6 CTC测定可用作转移连续性交高血压、乳腺癌与癌的实质性/不好生存率现代警告，但其个人兴趣处方、风险评估、酶质口服随之而来病因及现代除此以外病因发挥作用近期局限研究机构冒险。展望混合物组织学系统设计正以年近乎的速度快向年前蓬勃发展。随着微生物学系统设计的大幅革另行，混合物组织学测定的清晰度与特异连续性也大幅减少，使其成为下一代对抗的最主要"强力"。下一代混合物组织学蓬勃发展将集里于三个上都：(1)另行流行病学应该用拓展，例如CTC体外培养联合药敏筛选异化处方口服、获的CTC更进一步用作各种方规(如ARMS、FISH、NGS等)测定特异性、ctDNA生化趋同研究探究化疗获连续性致病选择性、以及混合物组织学系统设计个人兴趣生物免疫处方；(2)另行的测定遗传物质考古学家，外泌体、血小板以及可逆非解码RNA之前展露巨大流行病学应该用潜能，不足之处越来越深入的系统的数据研究表明其这两项性；(3)另行测定系统设计开发与转变成应该用，最主要单线粒体核酸、质可知系统设计、微流控微处理器及多普勒光可知等尖端系统设计正逐步走到框架数据研究研究所，离开流行病学研究所，依赖这些系统设计将贯彻减少混合物组织学的质量。我们应该从验证药理学的角度出发，立足于"准确连续性"与"流行病学直接连续性"这两个比如说，对混合物组织学项目的验证连续性能指标与流行病学意义进行时的系统研究报告，为个人兴趣流行病学精确护理提可供适当的观点框架与转变成依据。我们能够大幅总交经验，大幅减少认识，更进一步扩大约束，减少测定质量，全力推进混合物组织学的蓬勃发展，助力精确护理。